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十二传染性海绵状脑病2（第2页）

组织病理学变化仅见于脑干和脊髓，特征性的病理变化包括神经元的空泡变性与皱缩、灰质的海绵状疏松、星形胶质细胞增生等。

神经元的空泡形成表现为单个或多个的空泡出现在胞质内，典型的空泡呈圆形或卵圆形、界限明显，为液化的胞质团块。

海绵状疏松是神经基质的空泡化，使基质纤维分解而形成许多小孔。无病毒性脑炎的病理变化。

【诊断】

根据典型的临床症状（潜伏期长、双亲中有痒病病史、不断擦痒、反射性咬唇舔舌和运动性共济失调等）和特征性的组织病理学变化（神经元的空泡变性与皱缩、灰质的海绵状疏松、星形胶质细胞增生等），即可做出诊断。

但在新疫区或新发病群，确诊还必须进行有关的实验室诊断，如动物感染试验、PrP??的免疫学检测及痒病相关纤维（SAF）检查等。

1.动物感染试验

至今尚无可供检测朊病毒的细胞培养系统，只能使用动物做生物学测定。小鼠和仓鼠是最常用的实验动物。

将被检标本（脑、脊髓、脾等）匀浆做10倍稀释（8～10个稀释度），通常每个稀释度脑内接种6只小鼠（30μL）或仓鼠（50μL）。接种后每3d检查一次，濒死时扑杀取其脑做组织病理学检查。原代分离观察期，小鼠为1年或更久，仓鼠为7～8个月。最后根据动物发病和死亡数计算终点滴度（ID和LD??）。脑匀浆的终点滴度一般为每克脑组织10?～1011LD??。

2.PrP??的免疫学检测

PrP??只见于患传染性海绵状脑病的人和动物，而健康和患其他疾病的人和动物中的PrP??可被蛋白酶消化清除，不会干扰PrP??的检测。

因此，PrP??的检测是TSE的特异诊断方法，现已被WTO的TSE专家会议所确认。它不仅可用于死后的组织病理学检查，还可用于活体检测（脑、扁桃体）做生前诊断。PrP??虽不能使感染宿主产生特异抗体，但对非易感动物的兔却可产生抗他种动物PrP的抗体，以此抗体与被检材料（脑组织）做免疫（western）印迹检测，可检测其中的PrP??。

3.痒病相关纤维（SAF）检查

SAF检查也是TSE的特异诊断方法，在被检材料不适合做组织病理学检查时尤为重要。通常以冰冻保存的脑和脊髓作为被检材料。

取1～10g被检材料，以10%（mV）N-月桂酰肌氨酸溶液制备匀浆后，将抽提物在超速离心机上以22000g离心10min，540000g离心20min，540000g离心25min，沉淀物以蛋白酶K（PK10μgmL，37℃，1h）处理，然后悬浮于50μL蒸馏水，负染后做电镜检查。

4.单克隆抗体

在朊病毒病诊断上已广泛应用，以各种特异的单克隆抗体可区分小鼠、仓鼠和人的PrP??。最近又制备了只与各种动物PrP??共有位点而不与PrP?反应的特异单克隆抗体，应用此单克隆抗体时，标本无需蛋白酶K处理即可检测。

【防控】

由于本病的特殊性（潜伏期长、发病缓慢、无免疫应答），一般的防控措施无效。

对没有发生过本病的国家和地区，在输入种羊后发现本病，有必要全部淘汰并销毁（焚化或深埋）。

若有的种羊已分至另一些羊群，应将这些羊群封锁隔离，观察3.5年，观察期间发现病羊，可做同样处理。羊舍消毒可用次氯酸钠，有效氯浓度应不低于5×10ˉ?mgL，作用时间不少于1h。

用绵羊痒病病羊制成的骨肉粉饲喂牛和水貂等动物，可使其发生传染性海绵状脑病。

痒病朊病毒还可能使人致病，在国外一些研究痒病的人员中曾发现一种称为多发性脑脊髓硬化病，将死于该病的人脑组织接种冰岛绵羊，可发生一种与痒病无法区别的疾病。

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