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最后的结果让陆时羡很是意外。
在这种精细实验操作上,鲍勃的表现居然比作为女生的瑟琳还要好。
综合制备时间和效果,他得到的文库经过查验之后标准程度比较高。
虽然和陆时羡亲手制备的还比不了,但用来进行测序已经是基本满足要求了。
看着几人都是诧异地望着自己,鲍勃虽然也很意外,但在脸上毫无显现,然后骄傲地抬起头。
“看什么?”
“难道不允许我偷偷努力,然后惊艳所有人吗?”
不过,都是朝夕相处的队友,彼此什么习惯和水平都清楚。
估计是瞎猫碰上死耗子,但梅林和瑟琳没好意思去打击他。
“我假装信了。”陆时羡嘴上说着,心中还是比较开心的。
一个团队如果一直只靠固定的那么几个人,是不会存在太久的。
一个人的精力和时间是有限的,而探索无边宇宙和世界奥秘的事业却是无限的。
这也就注定单打独斗是走不远的。
有人能够站出来,分担一下他的压力,陆时羡感到有些欣慰。
“很好,那么文库制备这块工作就由鲍勃来负责,梅林你和瑟琳在完成其他步骤之后进行协助就好了。”
接下来的几天,经过不断的磨合。
这个四人小团队才逐渐走入了正轨。
没办法,和陆时羡这种以前熟练掌握过的不一样,在这项技术上,三人几乎是从头开始学习。
而且就这还只是前置准备工作,就几乎花费了一个星期的时间。
“你们之前已经知道在片段化操作中,这个过程是随机的,因此可能会出现平齐的末端,也有可能出现不平的末端,因此要进行末端修复,将产生的所有的3或5突出黏性末端转化成平末端。”陆时羡正解答着来自鲍勃的问题,
经过对新技术的不断上手操作,再结合他以前的实验经历,彼此碰撞之下,鲍勃产生了一些疑惑。
他的问题是:“末端修复加A碱基很好理解,是为了产生粘性末端,但进行接头连接全过程都要用到T4DNA聚合酶,让他有些不解。
这个问题比较基础,只能说鲍勃之前没有留意聚合酶的各种作用。
但陆时羡也没不耐烦,认真的回答道:“那是因为T4DNA聚合酶全程都在起作用,它的原理是不仅能够从5至3方向催化合成DNA,补平5突出末端,也具有3至5外切酶活性,帮助对3突出末端进行切平,最后将黏性末端DNA片段转变为平末端DNA。”
紧接着,梅林也贡献了一个问题。
他颇为疑惑地问道:“我们的样本里面含有的RNA中最多的是rRNA,如果直接对最后得到的RNA文库进行测序,那么数据里面可能会存在rRNA的测序数据,这个数据我怕会有一些误差啊?”
陆时羡不断在心中点头。
梅林能想到这一点,足以见到他思维的连贯性。
没办法,这个问题确实问的很关键,几乎决定了测序工作成功与否。
而他之前都没有主动提及这一环,是想着自己亲自上手处理时候在说一下的。
但现在既然有人说到这,提前一下也不是不行。
事实上,梅林的判断还是有些保守了。
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